分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。
儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器、信號(hào)處理器和顯示與存儲(chǔ)系統(tǒng)組成
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測(cè)試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計(jì)是精密儀器,正確安裝、使用和保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能和保證測(cè)試的準(zhǔn)確度有重要作用。
1、防止光電管疲勞
當(dāng)儀器不測(cè)定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管使用壽命。
2、比色皿使用方法
①拿比色皿時(shí),手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
?、谇逑幢壬髸r(shí),一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。如,比色皿被有機(jī)物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿,以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿,以免損傷它的透光面。每次做完實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)立即洗凈比色皿。
③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干,以保護(hù)透光面。
?、軠y(cè)定有色溶液吸光度時(shí),一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次,以免改變有色溶液的濃度。另外,在測(cè)定一系列溶液的吸光度時(shí),通常都按由稀到濃的順序測(cè)定,以減小測(cè)量誤差。
⑤在實(shí)際分析工作中,通常根據(jù)溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
3、對(duì)儀器工作環(huán)境的要求分光光度計(jì)應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺(tái)上,周圍不應(yīng)有強(qiáng)磁場(chǎng),以防電磁干擾,室內(nèi)溫度應(yīng)保持在10~30℃。
4、室內(nèi)應(yīng)干燥,相對(duì)濕度宜控制在<85 %,室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體,光線不宜過強(qiáng)。